白葉枯病是造成我國重要糧食作物——水稻嚴重減產(chǎn)的重要原因之一。某科研團隊將白葉枯病抗性基因Xa21與質(zhì)粒重組（圖1），利用人工破損處理的水稻幼苗細胞借助根癌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得抗白葉枯病的水稻品種，其中根癌農(nóng)桿菌侵染植物細胞過程如圖2所示，已知不同種限制酶識別序列不同。請回答：
（1）為獲取白葉枯病抗性基因Xa21，可以先從細胞中提取該基因的mRNA，然后經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA?；蚬こ痰暮诵牟襟E是 構(gòu)建基因表達載體構(gòu)建基因表達載體。
（2）使用PCR技術(shù)擴增白葉枯病抗性基因Xa21時，可選擇圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中的 B、CB、C作為引物，此過程還需要 TaqDNA聚合TaqDNA聚合酶。
（3）構(gòu)建圖1基因表達載體時，最佳方案是使用 BamHⅠ、HindⅢBamHⅠ、HindⅢ分別處理含Xa21基因的DNA片段和Ti質(zhì)粒，該方案不僅可以避免處理后的白葉枯病抗性基因Xa21和Ti質(zhì)粒發(fā)生 自身環(huán)化和反向鏈接自身環(huán)化和反向鏈接，也能確保Xa21基因定點插入Ti質(zhì)粒的 T-DNA片段T-DNA片段。
（4）基因表達載體上M抗生素抗性基因的作用是 有利于重組Ti質(zhì)粒的篩選有利于重組Ti質(zhì)粒的篩選。
（5）由圖2可知，水稻幼苗細胞受損后會產(chǎn)生某些信號分子，信號傳導(dǎo)到根癌農(nóng)桿菌細胞內(nèi)激活了Ti質(zhì)粒上的Vir區(qū)中的多個基因表達，其表達的蛋白質(zhì)的功能有 組裝形成通道復(fù)合體組裝形成通道復(fù)合體、催化產(chǎn)生單鏈T-DNA片段、與單鏈T-DNA片段結(jié)合形成成熟T復(fù)合體。農(nóng)桿菌細胞內(nèi)形成的成熟T復(fù)合體借助細胞膜上的通道復(fù)合體定向進入水稻幼苗細胞，最終目標是 將含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻細胞染色體DNA上將含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻細胞染色體DNA上。
（6）經(jīng)檢測，科研人員發(fā)現(xiàn)部分獲得Xa21基因的水稻幼苗不具有抗白葉枯病的能力，原因可能是 Xa2l基因轉(zhuǎn)錄或翻譯異常Xa2l基因轉(zhuǎn)錄或翻譯異常。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；構(gòu)建基因表達載體；B、C；TaqDNA聚合；BamHⅠ、HindⅢ；自身環(huán)化和反向鏈接；T-DNA片段；有利于重組Ti質(zhì)粒的篩選；組裝形成通道復(fù)合體；將含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻細胞染色體DNA上；Xa2l基因轉(zhuǎn)錄或翻譯異常
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6