新型冠狀病毒的檢測方法很多,實時熒光RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應)是目前核酸檢測的主要方法,操作流程:采集樣本→提取RNA→逆轉(zhuǎn)錄成cDNA→PCR擴增→結果分析。
技術操作流程如下,回答下列問題。
注:Q:信號淬滅劑,R:熒光信號劑
既有Q又有R的探針檢測不到熒光。
(1)①過程需要 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶,③過程中對兩種引物的要求是 兩種引物不能互相配對;足夠長一般為20~30個核苷酸;與目的基因兩端互補兩種引物不能互相配對;足夠長一般為20~30個核苷酸;與目的基因兩端互補(回答1點即可)。
(2)核酸檢測通常選取新冠病毒cDNA中的ORFlab基因的原因是 特異性強,結構穩(wěn)定特異性強,結構穩(wěn)定。若加入的熒光基因探針序列為:5'-TTGCT……AGATT-3',如果樣本中存在該基因序列,與探針結合的序列應該是5′-AATCT……AGCAA--AATCT……AGCAA-3′。若某人感染新冠病毒,則其樣本經(jīng)圖示流程處理后,最終 能能(填“不能”或“能”)被檢測到熒光。
(3)核酸檢測的優(yōu)點是只需采集少量樣本即能準確檢測,據(jù)圖分析可知,其原因是 少量樣本中的RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄和PCR后可獲得大量待測基因(DNA片段)少量樣本中的RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄和PCR后可獲得大量待測基因(DNA片段)。
(4)在制備新冠病毒某特定抗原的單克隆抗體過程中,提取B細胞與骨髓瘤細胞融合,兩次篩選的目的依次得 雜交瘤細胞、能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤雜交瘤細胞、能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。新冠單抗能準確結合新冠病毒,是因為單克隆抗體具有的特點是 特異性強、靈敏度高、可大量制備特異性強、靈敏度高、可大量制備。
【考點】單克隆抗體及其應用;DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;兩種引物不能互相配對;足夠長一般為20~30個核苷酸;與目的基因兩端互補;特異性強,結構穩(wěn)定;-AATCT……AGCAA-;能;少量樣本中的RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄和PCR后可獲得大量待測基因(DNA片段);雜交瘤細胞、能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤;特異性強、靈敏度高、可大量制備
【解答】
【點評】
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