擬利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將北極海魚的抗凍基因轉(zhuǎn)入番茄,以提高番茄的抗凍能力,請(qǐng)回答:
(1)將含抗凍基因的DNA和農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒Ti質(zhì)粒用相應(yīng)的限制性核酸內(nèi)切酶切割,形成相同黏性末端相同黏性末端,再用DNA連接酶連接獲得重組質(zhì)粒。
(2)將重組質(zhì)粒與經(jīng)CaCl2CaCl2處理的農(nóng)桿菌在離心管中混合,在離心管中加入液體培養(yǎng)基,置于搖床搖床中慢速培養(yǎng)一段時(shí)間,使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常狀態(tài)。選用的農(nóng)桿菌應(yīng)是限制性核酸內(nèi)切酶缺陷型菌株,原因是防止限制性核酸內(nèi)切酶將目的基因剪切防止限制性核酸內(nèi)切酶將目的基因剪切。
(3)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得含抗凍基因的番茄細(xì)胞后,經(jīng)脫分化形成愈傷組織,再通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(植物激素)配比營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(植物激素)配比誘導(dǎo)再生出新植株。
(4)請(qǐng)簡(jiǎn)要描述個(gè)體水平檢測(cè)轉(zhuǎn)基因番茄是否成功表達(dá)的實(shí)驗(yàn)思路:將轉(zhuǎn)基因番茄和正常番茄置于低溫環(huán)境下,比較轉(zhuǎn)基因番茄是否具有抗凍性狀將轉(zhuǎn)基因番茄和正常番茄置于低溫環(huán)境下,比較轉(zhuǎn)基因番茄是否具有抗凍性狀。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】Ti質(zhì)粒;相同黏性末端;CaCl2;搖床;防止限制性核酸內(nèi)切酶將目的基因剪切;營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(植物激素)配比;將轉(zhuǎn)基因番茄和正常番茄置于低溫環(huán)境下,比較轉(zhuǎn)基因番茄是否具有抗凍性狀
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:1難度:0.7
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