馬鈴薯Y病毒（PVY）是危害馬鈴薯的重要病毒之一，給馬鈴薯種植業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失?？蒲腥藛T利用PVY粒子免疫小鼠，獲得了PVY單克隆抗體以用于PVY檢測(cè)?；卮鹣铝袉栴}：
（1）科研人員為了鑒定植物細(xì)胞中的PVY，提取感染PVY植物的總RNA并放入反應(yīng)體系中，在
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶的作用下獲得cDNA，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增PVY特定基因的前提是 合成引物
合成引物
，擴(kuò)增過程中，每一輪循環(huán)要經(jīng)過 變性、復(fù)性（又稱退火）和延伸
變性、復(fù)性（又稱退火）和延伸
三個(gè)階段。
（2）在制備PVY單克隆抗體的過程中，科研人員用PVY粒子多次免疫小鼠，目的是 獲得足夠數(shù)量的B細(xì)胞
獲得足夠數(shù)量的B細(xì)胞
。對(duì)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)一步篩選，篩選方法是 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)
克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)
。
（3）科研人員篩選獲得了20B2和25C2兩種能產(chǎn)生抗PVY單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，并將其單克隆抗體分別與健康馬鈴薯植株的葉片組織、感染PVY馬鈴薯植株的葉片組織進(jìn)行抗原一抗體雜交檢測(cè)，結(jié)果如圖所示，其中健康馬鈴薯植株的編號(hào)是 ③和④
③和④
，判斷依據(jù)是 ③和④植株不會(huì)和PVY抗體發(fā)生抗原—抗體雜交反應(yīng)
③和④植株不會(huì)和PVY抗體發(fā)生抗原—抗體雜交反應(yīng)
。這兩種單克隆抗體所結(jié)合的抗原蛋白不同，原因可能是 兩種單克隆抗體是在PVY不同抗原的刺激下產(chǎn)生的
兩種單克隆抗體是在PVY不同抗原的刺激下產(chǎn)生的
。
