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新冠病毒是RNA病毒,病毒的S蛋白(刺突蛋白)是決定病毒入侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白,可與宿主細(xì)胞的受體結(jié)合。下面為兩種針對(duì)新冠病毒的疫苗研發(fā)方法以及抗S蛋白單克隆抗體制備過程?;卮鹣铝袉栴}。
方法 技術(shù)路線
基因工程疫苗 S蛋白基因→基因表達(dá)載體→大腸桿菌→S蛋白→人體
腺病毒載體重組疫苗 S蛋白基因→腺病毒基因表達(dá)載體→人體
單克隆抗體 免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞→雜交瘤細(xì)胞→單克隆抗體
(1)在制備疫苗的過程中,常采用
PCR
PCR
技術(shù)獲取和擴(kuò)增新冠病毒的S蛋白基因。擴(kuò)增時(shí),除了模板、四種脫氧核苷酸,還需要加入
引物
引物
和耐高溫的DNA聚合酶。基因工程疫苗研制過程中,目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)并且
(在受體細(xì)胞內(nèi))穩(wěn)定維持和表達(dá)出基因產(chǎn)物
(在受體細(xì)胞內(nèi))穩(wěn)定維持和表達(dá)出基因產(chǎn)物
,則說明目的基因完成了轉(zhuǎn)化。
(2)腺病毒載體重組疫苗是將S蛋白基因重組到改造后的腺病毒內(nèi),改造后的腺病毒載體應(yīng)具備的條件是
對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害、能夠在宿主細(xì)胞中自我復(fù)制、具有一至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)和標(biāo)記基因
對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害、能夠在宿主細(xì)胞中自我復(fù)制、具有一至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)和標(biāo)記基因
。(寫出兩點(diǎn))
(3)抗S蛋白單克隆抗體制備時(shí),先向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒S蛋白后分離產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞,并與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有
PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法
PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法
(答出2種);再多次篩選、檢測(cè),最終獲得所需雜交瘤細(xì)胞,該種細(xì)胞的特點(diǎn)是
既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體
既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體
。

【答案】PCR;引物;(在受體細(xì)胞內(nèi))穩(wěn)定維持和表達(dá)出基因產(chǎn)物;對(duì)宿主細(xì)胞無(wú)害、能夠在宿主細(xì)胞中自我復(fù)制、具有一至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)和標(biāo)記基因;PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法;既能迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6
  • 2.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題:

    (1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是 
     
    ,過程②選用的骨髓瘤細(xì)胞 
     
    (選填“能”或“不能”)在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。
    (2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
     
     
    ,才能篩選出足夠量的既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比,單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是
     
    (答出一點(diǎn))。
    (3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
     
    。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過
     
    次篩選,才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)?
     
    、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻,需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
    (4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是
     

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
  • 3.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />

    發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7
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