從自然界中的生物體內分離得到的天然酶，在工業(yè)生產環(huán)境中催化效率往往較低。研究人員利用易錯PCR技術對某種天然酶進行改造，獲得了高催化效率的酶。易錯PCR是利用低保真的Taq酶和改變PCR的反應條件，降低DNA復制的準確性，在新DNA鏈的合成過程中增加堿基錯配，從而使擴增產物出現(xiàn)較多點突變的一種體外誘導DNA序列變異的方法。如圖是利用易錯PCR改造某種天然酶的流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：
（1）Taq酶的某一區(qū)域負責將堿基與模板鏈正確地互補配對，Mn2+可以降低這一功能；非互補的堿基對由于氫鍵不易形成，穩(wěn)定性差，Mg2+可以提高該錯配區(qū)的穩(wěn)定性。因此，與普通PCR相比，易錯PCR的反應體系中應適當 提高提高（填“提高”或“降低”）Mn2+濃度、提高提高（填“提高”或“降低”）Mg2+濃度。
（2）圖中步驟①為易錯PCR過程，其擴增過程包括 變性、復性、延伸變性、復性、延伸三步。在擴增過程中，不需要在每次循環(huán)中重復加入Taq酶，是因為Taq酶具有 耐高溫（或在高溫下能保持酎的話性）耐高溫（或在高溫下能保持酎的話性）的特點。
（3）圖中步驟②是將構建的重組質粒溶于緩沖液中與用 Ca2+Ca2+處理的受體菌混合，在一定溫度下完成轉化。轉化是指 目的基因進入受體細胞并在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程目的基因進入受體細胞并在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。
（4）請闡述通過易錯PCR技術改造天然酶與通過蛋白質工程改造天然酶的本質區(qū)別。 易錯PCR技術是利用基因突變的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白質工程是利用基因重組的原理來改造天然酶，是定向的易錯PCR技術是利用基因突變的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白質工程是利用基因重組的原理來改造天然酶，是定向的。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】提高；提高；變性、復性、延伸；耐高溫（或在高溫下能保持酎的話性）；Ca2+；目的基因進入受體細胞并在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程；易錯PCR技術是利用基因突變的原理末改造天然配，是不定向的；而蛋白質工程是利用基因重組的原理來改造天然酶，是定向的
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：16引用：2難度：0.7
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1．以下是有關分離與鑒別DNA的技術，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
2．科研人員克隆了豬白細胞抗原基因（SLA-2基因），構建了該基因的真核表達載體，進行了豬腎上皮細胞表達研究。實驗的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復制原點的距離。請回答：
（1）過程①中，PCR擴增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質粒導入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質粒C后電泳，請在答題紙相應位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對真核細胞進行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細胞死亡又不會讓。實驗結果如圖2，根據(jù)實驗結果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細胞生產的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：42引用：3難度：0.6 -
3．下列關于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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