嗜熱土壤微生物A菌能產(chǎn)生一種具有耐熱性能的纖維素酶（簡(jiǎn)稱“B酶”），為使大腸桿菌具備降解纖維素的能力，更好的用于生產(chǎn)實(shí)踐，開展相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。回答下列問題：
（1）為獲取B酶基因，除PCR擴(kuò)增外；常用的方法還有

從基因文庫(kù)中獲取、化學(xué)方法人工合成

從基因文庫(kù)中獲取、化學(xué)方法人工合成

（回答2點(diǎn)）。
（2）利用PCR擴(kuò)增B酶基因依據(jù)的原理是

DNA半保留復(fù)制的原理

DNA半保留復(fù)制的原理

。
（3）上圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜，而B酶基因不含圖中限制酶的識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的B酶基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的B酶基因兩端需分別引入

NdeI和BamHI

NdeI和BamHI

不同限制酶的識(shí)別序列。
（4）轉(zhuǎn)基因大腸桿菌成功獲得了降解纖維素的能力，研究人員通過

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

的方法來確定轉(zhuǎn)基因大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生了B酶。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，與B酶相比，轉(zhuǎn)基因大腸桿菌降解纖維素的效率較低，試分析可能的原因是

轉(zhuǎn)基因大腸桿菌內(nèi)B酶的作用條件不適宜，B酶活性降低；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌內(nèi)B酶基因表達(dá)的量減少，B酶含量降低

轉(zhuǎn)基因大腸桿菌內(nèi)B酶的作用條件不適宜，B酶活性降低；轉(zhuǎn)基因大腸桿菌內(nèi)B酶基因表達(dá)的量減少，B酶含量降低

（回答2點(diǎn)）。
（5）本研究成功應(yīng)用于新農(nóng)村建設(shè)中的秸稈處理，與傳統(tǒng)秸稈焚燒相比，其優(yōu)點(diǎn)有

減少環(huán)境污染；實(shí)現(xiàn)分解產(chǎn)物的再利用，提高經(jīng)濟(jì)效益；實(shí)現(xiàn)能量的多級(jí)利用，提高能量的利用率

減少環(huán)境污染；實(shí)現(xiàn)分解產(chǎn)物的再利用，提高經(jīng)濟(jì)效益；實(shí)現(xiàn)能量的多級(jí)利用，提高能量的利用率

（回答2點(diǎn)）。