基因工程中，GUS基因編碼的酶可將無色底物生成藍色產物，GFP基因會產生綠色熒光蛋白，這兩種基因都可作為標記基因來研究發(fā)育生物學的問題。利用雙CRISPR/Cas9系統和Cre/loxP重組酶系統技術可更好地實現該研究。請據圖作答：
（1）圖1為雙CRISPR/Cas9系統作用示意圖。該系統能夠特異性識別DNA序列并切割特定位點的原因分別是向導RNA能識別特定序列向導RNA能識別特定序列、Cas9蛋白能定點切割DNA序列Cas9蛋白能定點切割DNA序列。圖中向導RNA與DNA結合的原理是堿基互補配對堿基互補配對。將刪除區(qū)切割后，轉入基因與原DNA片段可通過形成磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵拼接起來，形成新的DNA序列。
（2）雙CRISPR/Cas9系統可直接在靶細胞內起作用，與傳統的基因工程相比，該操作無需載體（運載體）載體（運載體）（填寫工具）。與質粒載體導入外源基因比，雙CRISPR/Cas9系統編輯的基因可以不含啟動子、終止子和標記基因啟動子、終止子和標記基因。
（3）圖2為Cre/loxP重組酶系統作用示意圖。利用雙CRISPR/Cas9系統可精準地將loxP序列、GUS基因及GFP基因連接，接上35S啟動子之后可在組織中檢測出藍色區(qū)而無綠色熒光區(qū)，這是由于GFPGFP基因自身無啟動子而無法表達。Cre基因是重組酶基因，經38℃熱處理后可被激活表達，在此前提下組織中可檢測出綠色熒光區(qū)，據此分析綠色熒光區(qū)形成的原因是重組酶能（特異性識別并）切割loxP序列，使GFP基因得以表達重組酶能（特異性識別并）切割loxP序列，使GFP基因得以表達。采用延長熱處理時間延長熱處理時間等技術手段可以擴大組織中綠色熒光區(qū)的面積。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】向導RNA能識別特定序列；Cas9蛋白能定點切割DNA序列；堿基互補配對；磷酸二酯鍵；載體（運載體）；啟動子、終止子和標記基因；GFP；重組酶能（特異性識別并）切割loxP序列，使GFP基因得以表達；延長熱處理時間
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：28引用：2難度：0.5
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