隨著變異新冠病毒奧密克戎不斷進化，歐美國家疫情一再反復，一些國家確診和死亡病例再現(xiàn)高峰。但是新冠病毒變異再快，也是在冠狀病毒這個大類里，通過生物信息學或大數(shù)據(jù)挖掘找到共用的靶抗原、發(fā)病機制或受體，可以快速指導疫苗的改良。研究發(fā)現(xiàn)，刺突蛋白（S蛋白）是新冠病毒非常重要的抗原蛋白，與病毒的傳染能力密切相關；N蛋白在新冠病毒中含量豐富，是一種高度免疫原性蛋白。基因測序結果顯示，新冠病毒的變異主要發(fā)生在刺突蛋白。根據(jù)所學知識，回答下列問題：
（1）接種疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段，我國科學家自主研發(fā)了多款新冠疫苗，其中腺病毒疫苗的制備技術要點是：將腺病毒的復制基因敲除，將以新冠病毒的

S

S

（填“S”或“N”）蛋白基因為模板合成的DNA插入腺病毒基因組，構建出重組腺病毒作為疫苗。該疫苗進入人體細胞內通過表達相應蛋白，從而引發(fā)特異性免疫反應，與蛋白質疫苗相比，該疫苗能夠更有效的誘發(fā)

細胞

細胞

（填“體液”或“細胞”）免疫。
（2）腺病毒疫苗、重組蛋白質疫苗等基因工程疫苗制備技術的原理都利用到了基因重組。已知限制酶的識別序列和切割位點如下表所示，DNA片段序列和質粒結構如圖1所示：

限制酶	NcoⅠ	SphⅠ
識別序列和切割位點	5′-C↓CATGG-3′	5′-GCTAG↓C-3′
限制酶	NheⅠ	BamHⅠ
識別序列和切測位點	5′-G↓GATCC3′	5′-G↓CTAGC-3′

根據(jù)DNA片段序列可判斷需要用限制酶

NcoⅠ和NheⅠ

NcoⅠ和NheⅠ

切割質粒B。
（3）基因測序也是新冠疫情防控的一把利刃，“實時熒光定量gPCR”通常在1～2h內即可得到檢測結果，其原理是在PCR體系中每加入一對引物的同時加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針，當Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成，如圖2所示：
①“實時熒光定量qPCR”所用的試劑盒中通常都應該含有、Taq酶、熒光探針、引物、四種脫氧核苷酸、

逆轉錄酶

逆轉錄酶

、緩沖劑等。
②反應最終的熒光強度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈

正

正

（填“正”或“負”）相關。上述技術還可以檢測基因

轉錄

轉錄

（填“復制”“轉錄”或“翻譯”）水平。