被我國列入“中國環(huán)境優(yōu)先污染物黑名單”的小分子化合物“1-D芘丁酸”（PBA）具有很強(qiáng)的致癌性。主要存在于空氣、水和土壤中。研究人員針對PBA制備單克隆抗體對其進(jìn)行免疫學(xué)檢測。
（1）PBA結(jié)構(gòu)簡單，一般要與特定蛋白BSA偶聯(lián)成大分子人工抗原（PBA-BSA）才能引起免疫反應(yīng)?？蒲腥藛T取12只生長狀況相同的健康小鼠均分成甲、乙、丙3組，分別用PBA-BSA、PBA、BSA間隔多次免疫。圖1為ELISA酶聯(lián)免疫吸附法檢測免疫小鼠血清抗體相對濃度的原理示意圖。

①檢測過程中需將PBA作為

抗原

抗原

固定在固相載體上，依次將

待檢抗體、酶標(biāo)二抗和底物

待檢抗體、酶標(biāo)二抗和底物

加入反應(yīng)體系。實驗過程中“充分洗滌”最主要的目的是

洗去未與PBA充分結(jié)合的待檢抗體以及酶標(biāo)二抗避免影響實驗結(jié)果

洗去未與PBA充分結(jié)合的待檢抗體以及酶標(biāo)二抗避免影響實驗結(jié)果

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②檢測結(jié)果若為甲組顯色較深，乙組、丙組幾乎不顯色，則說明

PBA只有與BSA偶聯(lián)成PBA—BSA才能起到免疫反應(yīng)

PBA只有與BSA偶聯(lián)成PBA—BSA才能起到免疫反應(yīng)

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（2）實驗中常用半抑制濃度（IC₅₀）評價抗體靈敏度：即取同樣濃度的不同來源抗體，分別檢測一半抗體被同一種抗原結(jié)合時所需抗原的最低濃度。圖2為（1）中甲組4只小鼠的血清抗體相對濃度和IC₅₀值。

據(jù)圖分析，制備PBA單克隆抗體時應(yīng)選擇

Ⅳ

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號小鼠用作細(xì)胞融合的供體，理由是

其抗體相對濃度較高且IC₅₀值最低即抗體靈敏度高

其抗體相對濃度較高且IC₅₀值最低即抗體靈敏度高

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