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艾滋病是由HIV(RNA病毒)引起的一種致死率極高的惡性傳染病,長期以來科學家通過不同路徑的研究針對其的治療與干預藥物。干擾素是一種常規(guī)用于治療病毒感染和癌癥的免疫活性蛋白質(zhì),圖1是構(gòu)建干擾素工程菌的過程示意圖。回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
限制酶 HindⅢ BanHⅠ PstⅠ EcoRⅠ SmaⅠ BgⅡ
識別序列 AAGCTT GGATCC CTGCAG GAATTC CCCGGG AGATCT
(1)圖1中,過程①屬于基因工程步驟為
A
A
,根據(jù)圖該過程需要 
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶。
A.獲取目的基因
B.目的基因與運載體重組
C.重組DNA分子導入受體細胞
D.篩選成功導入的受體細胞
(2)根據(jù)圖1與表中信息,過程②不宜單獨選用EcoRⅠ是因為
剪切后產(chǎn)生相同的粘性末端
剪切后產(chǎn)生相同的粘性末端
,單選該酶可能會產(chǎn)生
自身環(huán)化和反向鏈接
自身環(huán)化和反向鏈接
現(xiàn)象,應選用最佳的限制酶組合是
B
B
。
A.EcoRⅠBamHⅠ
B.BamHⅠ和BglⅡ
C.PstⅠ和BglⅡ
D.SmaⅠ和BamHⅠ
(3)要檢測重組DNA分子是否導入大腸桿菌,將③過程后的大腸桿菌先接種于含
青霉素
青霉素
的培養(yǎng)基上,然后將在該培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌接種在含
四環(huán)素
四環(huán)素
的培養(yǎng)基上,在前者培養(yǎng)基上能生長而在后者培養(yǎng)基上不能生長的是導入重組 DNA分子的工程菌。
(4)利用圖中工程菌生產(chǎn)的干擾素需進一步加工才能體現(xiàn)有效活性,請從生物的結(jié)構(gòu)分析這是因為
大腸桿菌作為原核生物不具備高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),無法對多肽進行加工形成確切的空間結(jié)構(gòu)
大腸桿菌作為原核生物不具備高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),無法對多肽進行加工形成確切的空間結(jié)構(gòu)
。
(5)HIV以T細胞為主要攻擊目標,原因是T細胞膜上存在HIV特異性識別的受體CD4和CCR5(圖2),研究結(jié)果顯示CD4分子是T細胞正常行使功能所必需的,CCR5不是必需的??茖W家針對受體CD4和CCR5開展了系列的治療可能性研究。圖2為HIV識別和侵染T細胞的過程;圖3為構(gòu)建“陷阱細胞”(乙)應對HIV的示意圖。請據(jù)圖設計一種應對HIV的方法和說明其原理:
構(gòu)建CCR5缺乏或變異的T細胞,使其CD4功能完整,則該T細胞功能正常,但無法被HIV感染;構(gòu)建表面有CD4與CCR5的成熟紅細胞,使得HIV進入紅細胞,但無法進行逆轉(zhuǎn)錄表達,則使其消亡
構(gòu)建CCR5缺乏或變異的T細胞,使其CD4功能完整,則該T細胞功能正常,但無法被HIV感染;構(gòu)建表面有CD4與CCR5的成熟紅細胞,使得HIV進入紅細胞,但無法進行逆轉(zhuǎn)錄表達,則使其消亡
。
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【答案】A;逆轉(zhuǎn)錄;剪切后產(chǎn)生相同的粘性末端;自身環(huán)化和反向鏈接;B;青霉素;四環(huán)素;大腸桿菌作為原核生物不具備高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),無法對多肽進行加工形成確切的空間結(jié)構(gòu);構(gòu)建CCR5缺乏或變異的T細胞,使其CD4功能完整,則該T細胞功能正常,但無法被HIV感染;構(gòu)建表面有CD4與CCR5的成熟紅細胞,使得HIV進入紅細胞,但無法進行逆轉(zhuǎn)錄表達,則使其消亡
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:12引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/11/7 11:0:1組卷:104引用:32難度:0.7
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    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
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    。
    (3)導入目的基因時,首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導入pZHZ8的鏈霉菌細胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應在
     
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    發(fā)布:2024/11/7 8:0:2組卷:5引用:1難度:0.5
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