如圖為利用人成纖維細(xì)胞（具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活）和小鼠骨髓瘤細(xì)胞（具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活）進(jìn)行人類基因定位的操作示意圖，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題．
（1）圖示方法是動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用，該技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)．
（2）操作所用的成纖維細(xì)胞應(yīng)傳代1010代以內(nèi)，誘導(dǎo)融合時(shí)需要加入的促融劑是PEG（或滅活病毒）PEG（或滅活病毒）．
（3）人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜融合形成，再經(jīng)過(guò)一次多（雙）核細(xì)胞有絲分裂多（雙）核細(xì)胞有絲分裂，形成單核細(xì)胞．
（4）HAT培養(yǎng)基起選擇選擇培養(yǎng)作用，培養(yǎng)時(shí)溫度應(yīng)為36.5±0.536.5±0.5℃，操作中加入烏本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞除去成纖維細(xì)胞．
（5）下表所示為雜交細(xì)胞A、B、C、D中存在的人類染色體及人類特有的4種酶（+表示存在，-表示不存在），這4種酶均為單基因編碼產(chǎn)生，據(jù)表推斷，編碼酶Ⅰ的基因位于11染色體上，編碼酶Ⅱ和ⅣⅡ和Ⅳ的基因位于染色體2上．
| 雜交細(xì)胞 | 酶 | 人類染色體 | |||||
| Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | 1 | 2 | 3 | |
| A | - | + | + | + | - | + | - |
| B | + | - | + | - | + | - | - |
| C | - | - | - | - | - | - | + |
| D | + | + | - | + | + | + | + |
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用；動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
【答案】動(dòng)物細(xì)胞融合；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；10；PEG（或滅活病毒）；多（雙）核細(xì)胞有絲分裂；選擇；36.5±0.5；除去成纖維細(xì)胞；1；Ⅱ和Ⅳ
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：3難度：0.5
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1．為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療，研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異，篩選有效的免疫治療靶點(diǎn)，制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
（1）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生，選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)，制備免疫小鼠所用的抗原時(shí)，應(yīng)提取區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
（2）將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠脾臟中獲取細(xì)胞，誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合，利用篩選得到雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)，多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，最終通過(guò)體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
（3）將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物（CLDN6-DMI）。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI（無(wú)關(guān)抗體-DMI）分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞活力，結(jié)果如圖1：
由圖可知，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞，依據(jù)是。
（4）如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制：由圖分析，CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是。發(fā)布：2024/12/19 7:0:1組卷：3引用：1難度：0.6 -
2．為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用，某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造，制備了人—鼠嵌合抗體F′，具體流程為：提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA，逆轉(zhuǎn)錄后通過(guò)PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列，將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換，再構(gòu)建表達(dá)載體，在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì)，他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用（F′與F初始濃度相同）時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力，結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/19 1:0:1組卷：39引用：4難度：0.5 -
3．2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/19 6:0:1組卷：42引用：2難度：0.6
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