新冠病毒（+RNA）的刺突蛋白S通過與人體黏膜細胞表面的ACE2受體結(jié)合而進入細胞，是宿主抗體的重要作用位點。如圖1是科研人員利用新冠病毒的+RNA提取S蛋白基因和S蛋白受體結(jié)合域RBD基因作為抗原基因序列，研制新冠病毒雙抗原疫苗的技術路線。已知PCR1與PCR2要分別進行，然后將產(chǎn)物混合，使用引物1和引物4進行PCR3，最終獲得大量S-RBD融合基因（1300bp）。
（1）新冠病毒囊膜主要由 蛋白質(zhì)和磷脂蛋白質(zhì)和磷脂組成，囊膜上蛋白質(zhì)的合成場所在 宿主細胞的核糖體（或宿主細胞的核糖體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）宿主細胞的核糖體（或宿主細胞的核糖體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）。
（2）PCR3過程中，片段1與片段2連接形成S-RBD融合基因，需要使用 耐高溫的DNA聚合（Taq酶）耐高溫的DNA聚合（Taq酶）酶，該酶的作用是 將單個的脫氧核苷酸連接到引物的3’端將單個的脫氧核苷酸連接到引物的3’端。為使S-RBD融合基因能與pX質(zhì)粒相連接，并在工程菌中表達時先合成S蛋白，則PCR1過程中，應在引物1的5′端添加的限制酶序列是 5'CATATG3'5'CATATG3'。
（3）為初步檢測過程B構(gòu)建是否成功，對重組pX系列質(zhì)粒及其酶切產(chǎn)物進行凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖2。據(jù)圖可知，酶切時用到的酶是 HindⅢ、Ndel、EcoRIHindⅢ、Ndel、EcoRI，重組質(zhì)粒pX2和pX5構(gòu)建成功的依據(jù)是 重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對總和為S—RBD融合基因長度1300重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對總和為S—RBD融合基因長度1300。
（4）在工程菌的篩選時，可先后用兩種抗生素進行影印培養(yǎng)實驗（即使用無菌的絨氈布壓在培養(yǎng)基A的菌落上，帶出少許菌種，平移并壓在培養(yǎng)基B上），在培養(yǎng)基B中存活的菌落是否含有目的基因 否否（填“是”或“否”）。鑒定重組pX質(zhì)粒是否導入工程菌還可以采用的方法是 觀察菌落是否具有熒光觀察菌落是否具有熒光。
（5）試從免疫學角度分析此種雙抗原疫苗比常規(guī)S蛋白疫苗更具優(yōu)勢的原因 此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進入靶細胞，從而激發(fā)細胞免疫此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進入靶細胞，從而激發(fā)細胞免疫。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】蛋白質(zhì)和磷脂；宿主細胞的核糖體（或宿主細胞的核糖體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）；耐高溫的DNA聚合（Taq酶）；將單個的脫氧核苷酸連接到引物的3’端；5'CATATG3'；HindⅢ、Ndel、EcoRI；重組質(zhì)粒pX2和pX5酶切后形成的750和550片段堿基對總和為S—RBD融合基因長度1300；否；觀察菌落是否具有熒光；此種雙抗原疫苗含有S蛋白受體結(jié)合域RBD，有利于進入靶細胞，從而激發(fā)細胞免疫
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：9引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6